5—羥(qian)甲基糠醛(quan)（5—Hydroxymethyl furfural，簡稱(cheng)5—HMF）是葡萄(tao)(tao)(tao)糖(tang)(tang)等(deng)單糖(tang)(tang)化合(he)(he)(he)物在高溫或弱酸(suan)等(deng)條件下脫水產生(sheng)(sheng)的一個醛(quan)類化合(he)(he)(he)物。該化合(he)(he)(he)物穩定(ding)性(xing)不好，容(rong)易(yi)分(fen)解(jie)成乙酰(xian)丙(bing)酸(suan)和甲酸(suan)，或發生(sheng)(sheng)聚合(he)(he)(he)反應。一方(fang)面，5—HMF對人體(ti)橫紋(wen)肌和內臟有損害(hai)；另一方(fang)面，葡萄(tao)(tao)(tao)糖(tang)(tang)注射液在高溫情(qing)況下顏色(se)容(rong)易(yi)變黃，雖然5—HMF本身無色(se)，但由(you)于(yu)5—HMF可(ke)發生(sheng)(sheng)聚合(he)(he)(he)而由(you)聚合(he)(he)(he)物導致變色(se)，且葡萄(tao)(tao)(tao)糖(tang)(tang)注射液顏色(se)的深淺與5—HMF產生(sheng)(sheng)量成正(zheng)比。

    　5—HMF的量可指代(dai)產(chan)品中葡(pu)(pu)萄(tao)(tao)糖(tang)(tang)的分解程度(du)，葡(pu)(pu)萄(tao)(tao)糖(tang)(tang)有α—葡(pu)(pu)萄(tao)(tao)糖(tang)(tang)和β—葡(pu)(pu)萄(tao)(tao)糖(tang)(tang)兩(liang)個異構體，它(ta)們與鏈(lian)(lian)式結(jie)構A存在平衡，通過鏈(lian)(lian)式結(jie)構A可生成大量的四氫呋喃類物質。經過脫(tuo)水反應后生成 5—羥(qian)(qian)甲(jia)基(ji)糠(kang)醛(quan)， 5—羥(qian)(qian)甲(jia)基(ji)糠(kang)醛(quan)受(shou)熱(re)后再(zai)生成 5—甲(jia)基(ji)糠(kang)醛(quan)、糠(kang)醛(quan)和其它(ta)呋喃類物質。因此，糠(kang)醛(quan)、 5—甲(jia)基(ji)糠(kang)醛(quan)和 5—羥(qian)(qian)甲(jia)基(ji)糠(kang)醛(quan)是葡(pu)(pu)萄(tao)(tao)糖(tang)(tang) 主要裂解產(chan)物。5—羥(qian)(qian)甲(jia)基(ji)糠(kang)醛(quan)含(han)量指標控制為小于300ppm。

    　1 試(shi)劑(ji)

    　乙酸乙酯、乙腈 、乙酸、乙酸鹽緩沖液、標準品：5—羥甲基糠醛純度＞99%、5—羥甲基糠醛標準儲備液、5—羥甲基糠醛標準工作液。
    　1.1 冰醋酸（分析純）；
    　1.2 乙酸乙酯（分析純）；
    　1.3 乙腈：色譜純  一級品  含量>99.9%；
    　1.4 醋酸溶液：c（CH3COOH）=0.2mol/L；
      1.5 醋酸鈉溶液：c（CH3COONa）=0.2mol/L；
    　1.6 醋酸鹽緩沖溶液（pH=4.00）：醋酸水溶液：醋酸鈉水溶液=164：36（v/v）；
    　無水碳酸鈉(na)溶(rong)液：c（Na2CO3）=14g/L。

圖譜1

峰參數1

圖譜2

峰參數2

    　2 檢驗(yan)步驟(zou)

    　2 .1試(shi)樣(yang)溶液的(de)制備：

　　稱取試(shi)樣4. 8g―5. 2g，置(zhi)于(yu)(yu)125ml的心(xin)形瓶(ping)中，用(yong)約(yue)25ml蒸餾水(shui)(shui)稀釋(shi)，然后加入(ru)(ru)30ml乙(yi)(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)(yi)酯(zhi)振(zhen)蕩(dang)5min，靜置(zhi)分層(ceng)(ceng)。將水(shui)(shui)層(ceng)(ceng)放入(ru)(ru)另(ling)一(yi)(yi)個心(xin)形瓶(ping)中，用(yong)30ml乙(yi)(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)(yi)酯(zhi)重復萃(cui)(cui)取兩次，棄去(qu)水(shui)(shui)層(ceng)(ceng)，合(he)并(bing)三次乙(yi)(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)(yi)酯(zhi)萃(cui)(cui)取液于(yu)(yu)另(ling)一(yi)(yi)心(xin)形瓶(ping)中，再(zai)加入(ru)(ru)10ml碳(tan)酸(suan)(suan)鈉(na)水(shui)(shui)溶(rong)(rong)液立即振(zhen)蕩(dang)，靜置(zhi)分層(ceng)(ceng)（此(ci)凈(jing)化操作(zuo)應(ying)在短文源于(yu)(yu)中原(yuan)酒報2min內完成）。再(zai)用(yong)20ml乙(yi)(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)(yi)酯(zhi)提取碳(tan)酸(suan)(suan)鈉(na)水(shui)(shui)層(ceng)(ceng)一(yi)(yi)次。棄去(qu)碳(tan)酸(suan)(suan)鈉(na)水(shui)(shui)層(ceng)(ceng)，合(he)并(bing)乙(yi)(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)(yi)酯(zhi)提取液，并(bing)加入(ru)(ru)9滴冰醋酸(suan)(suan)，全部(bu)轉(zhuan)(zhuan)移至(zhi)旋轉(zhuan)(zhuan)蒸發器內，于(yu)(yu)40℃―45℃下(xia)，蒸至(zhi)剩(sheng)余溶(rong)(rong)液約(yue)為(wei)1ml―2ml時，卸(xie)下(xia)心(xin)形瓶(ping)，在40℃下(xia)用(yong)氮(dan)氣吹干，用(yong)1ml醋酸(suan)(suan)鹽緩沖(chong)溶(rong)(rong)液溶(rong)(rong)解殘留物(wu)，用(yong)帶有(you)0.45μm水(shui)(shui)系(xi)濾膜的針頭(tou)式過濾器濾入(ru)(ru)樣品瓶(ping)，作(zuo)為(wei)試(shi)樣溶(rong)(rong)液。如果試(shi)樣溶(rong)(rong)液不能及時測試(shi)時，應(ying)先存(cun)放在冰箱中冷(leng)藏，但不得超過48小時。

    　2 .2  5—羥甲基糠醛標準儲備液配制：
　　稱取10mg的(de)羥(qian)甲基糠醛，用乙酸鹽(yan)緩(huan)沖溶(rong)液稀(xi)釋成100ug/ml的(de)標準儲備液。

    　2 .3  5—羥甲基糠醛標準工作液配制：
　　將上述標準(zhun)儲(chu)備液(ye)(ye)再(zai)用(yong)乙酸鹽緩(huan)沖(chong)溶液(ye)(ye)配制成濃度為10ug/ml標準(zhun)工作液(ye)(ye)。

    　3 儀器
    　美國戴(dai)安公司(si)生產(chan)ICS300離(li)子(zi)色譜(pu)，Ultimate3000 varible waveleng detector紫(zi)外檢(jian)測器。旋轉蒸發儀、一次(ci)性濾膜0.45um 、1ml—5ml、5ml—10ml加樣槍，色譜(pu)柱Diamonsil5uc18　250×4.6mm，美國密理(li)博公司(si)生產(chan)的(de)Direct—Q3超純水機。

    　4 色譜條件
    　ICS300離子色譜、紫外檢測器、5uc18  250×4.6mm色譜柱。
    　流動相: 乙腈：水=10：90（v/v）；
    　流速： 1.0ml/min；
    　柱溫：35℃；
    　檢測波長： 276nm；
    　進樣體積： 10μl；
    　保留時間：羥甲基糠醛5.2min。
    　上述操作參數(shu)可根據儀器(qi)情況對(dui)給定的參數(shu)做適當的調整，以期獲得(de)最佳(jia)效果。

    　5 色譜測定
    　準確注射10uL樣(yang)(yang)液于離子色譜儀(yi)中，進行(xing)分(fen)析，響應值均在儀(yi)器檢測的線(xian)性范圍(wei)內。對標準工作液和樣(yang)(yang)液等體(ti)積參(can)插進樣(yang)(yang)測定，以外標法定量。在色譜條件下(xia)，5—羥甲基糠醛保留(liu)時間(jian)5. 2分(fen)鐘(zhong)左右。

    　從上(shang)述(shu)分(fen)析(xi)情況來看(kan)，果(guo)汁中(zhong)5—羥甲(jia)基糠醛(quan)的(de)含(han)量很低。主要(yao)是要(yao)在(zai)果(guo)汁的(de)壓榨工藝(yi)過(guo)程中(zhong)，在(zai)高溫或弱酸條(tiao)件下脫水等(deng)工藝(yi)條(tiao)件及(ji)衛生條(tiao)件的(de)嚴(yan)格控制(zhi)下，最大程度上(shang)降低5—羥甲(jia)基糠醛(quan)成分(fen)的(de)產生。